Научен метод за количествено определяне на NMN в биологични проби
1. Въведение
Допълване на никотинамид мононуклеотид (NMN) за регулиране на нивото на никотинамид аденин динуклеотид (NAD+) е разкрито, че е обещаваща интервенция против стареене. Въпреки това все още е сериозно предизвикателство точното количествено определяне на междинните продукти на NAD+, НМН по-специално. Това изследване има за цел да въведе нов метод, двойно изотопно-медиирана LC-MS/MS методология (dimeLC-MS/MS), за прецизно количествено определяне на НМН в биологични проби.
2. Фактори, влияещи върху точното откриване на NMN
NMN е трудно да бъде точно открит поради уязвимостта му към ензимно разграждане, преобразуване при обработка на проби, сложното му поведение в различни колони и условия на екстракция, както и матричен ефект.
По-конкретно, NMN има свойствата на висока полярност и ниска летливост, която лесно се разтваря във вода, но трудно се разтваря в органични разтворители. Тези свойства силно ограничават прилагането на много конвенционални методи за количествен анализ.
BИологични проби катокръвта носи значителна активност на CD38 и CD73 (ecto-5’-нуклеотидаза), като и двете могат да използват NMN като субстрат.
Поведението на NMN в колоната е много сложно, вероятно поради двустранния характер на неговите заряди, така че фините разлики в екстракцията и условията на колоната значително влияят върху надеждното и точно откриване на NMN.
3. Стратегии за справяне с dimeLC-MS/MSза намаляване на въздействието на импакт факторите
За да се избегне намесата на гореспоменатите фактори, се прилага прототипна колона NMN-2. Тази колона съдържа силициеви частици с висока чистота на основата на C18, които са по-способни да свързват хидрофилни съединения от въглеродните частици, подобрявайки способността за разделяне.
Използва се хлорна киселина (PCA), тъй като може ефективно да извлича NAD+ и NMN от биологични проби като плазма с минимални загуби.
За да се коригират матричните ефекти, фиксирано количество (1 μM) от всяко изотопно съединение се добавя към биологичните проби преди екстракцията на PCA.
4. Предимствотоsна dimeLC-MS/MS
Двойните изотопни NMN стандарти, NMN (M + 14) и NMN (M + 5), в методологията, управлявана от LC-MS/MS, могат точно да проследят съдбата на NMN по време на обработката на пробата, което значително повишава точността и надеждността на измерването на NMN в биологични проби. Освен това, dimeLC-MS/MS може да оцени ефективността на екстракция и абсолютните концентрации на NMN в различни видове биологични проби.
5. Заключение
ТЕнов LC-MS/MS-Задвижваната методология с двойни изотопни NMN стандарти може точно и надеждно да измери NMN в биологични проби.Може да се използва за бъдещи проучвания на приема на NMN.
6. Референтен документ
Unno, Junya et al. "Абсолютно количествено определяне на никотинамид мононуклеотид в биологични проби чрез двойна изотопно-медиирана течна хроматография-тандемна масспектрометрия (dimeLC-MS/MS)." npj стареене том 10,1 2. 2 януари 2024 г., doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Защо да изберете BONTAC?
BONTAC е лидер на глобалния НМН промишленост. Разполагаме с първата технология за катализа на цели ензими в Китай и се превърнахме във водещо предприятие за коензимни продукти, които се използват широко в здравната индустрия, медицината и красотата, зеленото земеделие, биомедицината и други области. По-специално, BONTAC е НМН доставчик на суровини от известния екип на Дейвид Синклер в Харвардския университет. Нашите услуги и продукти са надеждни. Освен това BONTAC има независим изследователски център за коензимни инженерни технологии на провинциално ниво в Китай и самостоятелни фабрики, където могат да бъдат осигурени чистотата и стабилността на продуктите.
Отричане
ТЕ Статията евъз основа на препратката вакадемично списание. Съответната информация е доставям само за споделяне и обучение и не представлява медицински съвети. Ако има някакво нарушение, моля контактАвторът заизтриванейон. Становищата, изразени в този член, не отразяват позицията на BONTAC.