Научен метод за количествено определяне на NMN в биологични проби
1. Въведение
Допълване наникотинамид мононуклеотид (NMN)за повишаване на нивото на никотинамид аденин динуклеотид (NAD+) е обявено като обещаваща интервенция против стареене. Въпреки това все още е сериозно предизвикателство точното количествено определяне на междинните продукти на NAD+,НМНпо-специално. Това проучване има за цел да въведе нов метод, двойна изотопно-медиирана LC-MS/MS методология (dimeLC-MS/MS), за точно количествено определяне наНМНв биологични проби.
2. Фактори, влияещи върху точното откриване на NMN
NMN е трудно да бъде точно открит поради уязвимостта си към ензимно разграждане, преобразуване при обработка на проби, сложното му поведение при различни условия на колона и екстракция, както и матричния ефект.
По-конкретно, NMN има свойствата на висока полярност и ниска летливост, която е лесна за разтваряне във вода, но трудна за разтваряне в органични разтворители. Тези свойства значително ограничават прилагането на много конвенционални методи за количествен анализ.
BИологични пробикатокръвта носи значителна активност на CD38 и CD73 (ECTO-5’-нуклеотидаза), като и двете могат да използват NMN като субстрат.
Поведението на NMN в колоната е много сложно, вероятно поради двустранния характер на нейните заряди, така че фините разлики в екстракцията и условията на колоната значително влияят върху надеждното и точно откриване на NMN.
3. Стратегии за справяне наdimeLC-MS/MSза намаляване на въздействието на факторите на въздействие
За да се избегне намесата на гореспоменатите фактори, се прилага прототипна колона NMN-2. Тази колона съдържа силициев диоксид с висока чистота на базата на C18, които са по-способни да свързват хидрофилни съединения, отколкото въглеродните частици, подобрявайки способността за разделяне.
Използва се хлорна киселина (PCA), тъй като може ефективно да извлича NAD+ и NMN от биологични проби като плазма с минимални загуби.
За да се коригират матричните ефекти, фиксирано количество (1 μM) от всяко изотопно съединение се добавя към биологичните проби преди екстракцията на PCA.
4. Предимствотоsна dimeLC-MS/MS
Двойните изотопни NMN стандарти, NMN (M + 14) и NMN (M + 5), в методологията LC-MS/MS-управлявана могат прецизно да проследят съдбата на NMN по време на обработката на пробите, което значително повишава точността и надеждността на измерването на NMN в биологични проби. Освен това, dimeLC-MS/MS може да оцени ефективността на екстракция и абсолютните концентрации на NMN в различни видове биологични проби.
5. Заключение
ТойЕнов LC-MS/MS-методологията с двойни изотопни NMN стандарти може точно и надеждно да измерва NMN в биологични проби.Може да се използва за бъдещи проучвания на приема на NMN.
6. Препратка
Unno, Junya et al. "Абсолютно количествено определяне на никотинамид мононуклеотид в биологични проби чрез двойна изотопно-медиирана течна хроматография-тандемна масспектрометрия (dimeLC-MS/MS)." NPJ стареене том 10,1 2. 2 януари 2024 г., doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Защо да изберетеБОНТАК?
БОНТАКе лидер в световнияНМНпромишленост. Имаме първата технология за катализа на цели ензими в Китай и се превърнахме във водещо предприятие в коензимни продукти, които се използват широко в здравната индустрия, медицината и красотата, зеленото земеделие, биомедицината и други области. По-специално, BONTAC е НМНдоставчик на суровини на известния екип на Дейвид Синклер в Харвардския университет. Нашите услуги и продукти са надеждни. Освен товаБОНТАКима независим изследователски център за технологии за инженерство на коензими на провинциално ниво в Китай и самостоятелни фабрики, където може да се гарантира чистотата и стабилността на продуктите.
Отричане
ТойЕстатията евъз основа на позоваването вакадемично списание. Съответната информация едоставямСамо за целите на споделяне и обучение и не представлява медицински съвети. Ако има нарушение, моля,контактАвторътзаДелетйон. Мненията, изразени в тази статия, не представляват позицията наБОНТАК.