Изключителни предимства на ултрачувствителната ELISA с Thio-NAD цикъл при определяне на протеина на денга NS1

1. Въведение

Денга треската е остро инфекциозно заболяване, причинено от Вирус на денгачрез ухапване от заразен вид Aedes (Ae. aegypti или Ae. albopictus) комар, с основните симптоми като висока температура, замаяност, главоболие, обрив и Силнаболки (болки в очите, мускулите, ставите или костите) и др. Това заболяване е широко разпространено в тропическия и субтропичния климат. Приблизително 100 до 400 милиона души се заразяват всяка година, като над 80% обикновено са леки и безсимптомни. Въпреки това, тежката треска на денга може да увеличи риска от смърт, ако не се лекува правилно. По този начин ранната диагностика на това заболяване е важна за навременното му лечение.

Трябва да се отбележи, че неструктурният протеин 1 (NS1), силно консервиран гликопротеин, се секретира главно по време на инфекцията на Денга вирус, което се счита за основен фактор за патогенеза на Треска денга. Следователно, NSI обикновено се използва като биомаркер за ранно откриване на това заболяване.

В това проучване имуносорбентен анализ, свързан с сандвич ензим(ЕЛИСА)в комбинация с тио никотинамид аденин динуклеотид (тио-NAD/S-NAD) Метод на колоездене (наричана по-нататък ултрачувствителна ИФА) се използва за откриване на НСИ, последвано от сравнение с NAAT, за да се потвърди точността на откриването му.

2. Предимства и недостатъци на традиционните методи за откриване на Треска денга 

Понастоящем тЕто четири основни метода за откриване за Треска денга.


Изолирането и идентифицирането на вируса имат висока специфичност, но отнемат много време, отнемат поне 5 дни. Бързият антигенен тест е най-бързият и рентабилен сред другите методи, но чувствителността и специфичността са относително ниски. Серологичното изследване, базирано на IgM и IgG, е ограничено от броя на дните на инфекция, тъй като В Тестът трябва да се отложи, докато нивото на антителата се повиши до откриваемо ниво.

В клиниката NAAT често се прилага за определяне Треска денгаот мръсотия с висока чувствителност и специфичност. Този метод обаче е скъп, трудоемък и склонен към фалшива позитивност, която трябва да се провежда от обучен персонал. За да се преодолеят недостатъците на тези методи, нов метод за откриване ултрачувствителната ELISA е приложени в това проучване.

3. Работен процес на ултрачувствителна ELISA с тио-NAD цикъл

Чифт антитела Еизползва се за улавяне на протеина NS1 в сандвича ELISA и алкална фосфатаза Емаркирани върху вторичното антитяло. Освен антителата, андростероново производно, 3α-хидроксистероид дехидрогеназа, тио-NAD и NADH смеизползва се за изграждане на системата за цикъл на ензима тио-NAD. По време на цикличната реакция на тио-NAD, тио-NADH постоянно се натрупва по триъгълен начин и може да бъде директно измерен при абсорбция от 405 nm.

4. Сравнението на ултрачувствителната ELISA и NAAT при откриването на протеин Dengue NS1

В NAAT 60 екземпляра са положителни за денга, а 25 са отрицателни за денга. Праговата стойност на цикъла на NAAT (CT) на тези положителни за денга проби варира от 12,42 до 31,41. При свръхчувствителната ELISA 59 проби са съответно положителни за резултатите от NAAT, докато 25 проби са напълно съответно отрицателни за резултатите от NAAT.

В сравнение с NAAT, чувствителността и специфичността на ултрачувствителната ELISA са съответно 98,3% и 100% (Таблица 2). От 60 потвърдени с NAAT положителни проби от денга, само 1 проба е отрицателна при ултрачувствителната ELISA. Данните на NAAT показват, че пробата е случай на инфекция с DENV тип 4 със стойност на КТ 21,59. Резултатите от ултрачувствителната ELISA са в почти перфектно съответствие с резултатите на NAAT, със стойност на капа от 0,972 (95% CI: 0,917-1.0).

5. Заключение

Ултрачувствителният метод ELISA е лесен за изпълнение и не изисква професионални обучаеми за работа. Откриването може да започне веднага след получаване на малка проба. Той е особено подходящ за ранно откриване на болестта денга в страните с ниски доходи.

Препратка

Chen, Po-Kai et al. "Усъвършенстван метод за откриване на протеин на денга NS1 с помощта на ултрачувствителна ELISA с Thio-NAD цикъл." Вируси, том 15,9, 1894. 8 септември 2023 г., doi:10.3390/v15091894

Предимства и характеристики на продукта BONTAC Thio-NAD/S-NAD

BONTAC е oедно от малкото предприятия в Китайкоито могат да произвеждат Thio-NADс "Бонзим"Цялостен ензимен метод(екологично чист;без вредни остатъци от разтворители) и уникална технология за пречистване в седем стъпки "Bonpure". BONTAC съчетава научноизследователска и развойна дейност, производство и продажба, с самостоятелни фабрики и редица международни сертификати за осигуряване на високо качество и стабилни доставки на продукти.

Отричане

BONTAC не носи отговорност за каквито и да било искове, произтичащи пряко или косвено от вашето разчитане на информацията и материалите на този уебсайт.