Научен метод за количествено определяне на NMN в биологични проби
1. Въведение
Допълване на никотинамид мононуклеотид (NMN) да се регулира ниво на никотинамид аденин динуклеотид (NAD+) беше разкрито като обещаваща интервенция срещу стареене. Въпреки това, все още е сериозно предизвикателство към точността количествено определя NAD+ междинните продукти, NMN по-специално. Това изследване има за цел да въведе нов метод – методология с двойно изотопно медиирана LC-MS/MS (DIMELC-MS/MS) за точна количествена оценка на NMN В биологични проби.2. Фактори, влияещи върху точното откриване на NMN
NMN е трудно да бъде точно открит поради уязвимостта си към ензимни вещества деградация, преобразуване при обработка на проби, сложни поведения при различни колони и условия на извличане, както и ефект на матрицата.
Specifically, NMN има the properties на high polarity and low volatility, което е easy to dеsolve in water but difficult to dеsolve in organic solvents. These properties greatly restrict the applicatйон на many conventйонal quantitative analysе methods.
BИологични проби като Кръвта носи значителна активност на CD38 и CD73 (екто-5’-нуклеотидаза), и двете могат да използват NMN като субстрат.
Поведението на NMN в колоната е много сложно, вероятно поради двуделния характер на зарядите му, така че фини разлики в извличането и условията на колоната значително влияят на надеждното и точно откриване на NMN.
3. Стратегии за справяне с dimeLC-MS/MS за намаляване на въздействието на импакт факторите
За да се избегне интерференцията на гореспоменатите фактори, a pРототип Колона NMN-2 се прилага. Тази колона съдържатs C18-базирани високочисти силициев силициев цилициев които са по-способни да свързват хидрофилни съединения от въглеродните частици, подобрявайки способността за разделяне.PЕрхлорна киселина (PCA) се използва, тъй като може ефективно извличане на NAD+ и NMN от биологични проби като плазма с минимален брой Загуби.
За да коригираме ефектите на матрицата, a fixed amount (1 μM) на each Изотопно съединение is добавено към Биологичен проби преди извличането на PCA.
4. Предимствотоs на dimeLC-MS/MS
Double еotopни стандарти на NMN, NMN (M + 14) и NMN (M + 5), в методологията, базирана на LC-MS/MS, могат прецизно да проследят съдбата на NMN по време на обработката на проби, което значително увеличава точността и надеждността на измерването на NMN в биологични проби. Besides, dimeLC-MS/MS може evaluate the extractйон efficiency and the absolute concentratйонs на NMN in different types на bИологични проби.
5. Заключение
Thе нов LC-MS/MS-методология, управлявана с двойни изотопни стандарти на NMN може accuraТели и Reliably измервайте NMN в биологични проби. Може да се използва за бъдещи изследвания на приема на NMN.6. Референция
Unno, Junya et al. “Absolute quantificatйон на nicotinamide mononucleotide В биологични проби by double еotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS).” npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Защо да изберете BONTAC?
BONTAC е лидер на глобалния NMN индустрия. Разполагаме с първата технология за катализа на цели ензими в Китай и сме се превърнали във водещо предприятие в коензимни продукти, които се използват широко в здравната индустрия, медицината и красотата, Зелено земеделие, биомедицина и други области. Забележително е, BONTAC е NMN доставчик на суровини на известния екип на Дейвид Синклер в Харвардския университет. Нашите услуги и продукти са надеждни. Освен това, BONTAC има независим коензим Изследователски център за инженерни технологии на провинциално ниво в Китай и самостоятелни фабрики, където чистотата и стабилността на продуктите могат да бъдат гарантирани.
